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微量分光光度计如何检测蛋白
2020-05-11 浏览:61

为大家简单介绍一下关于超微量分光光度计如何检测蛋白A280: 蛋白和核酸不一样,具有很强的多样性。功能应用于检测那些含有Trp、Tyr残基或者含有Cys-Cys二硫键的纯蛋白,这些蛋白在280nm吸光度明显。本机方法不需要构建标准曲线,而是检测吸光度后,直接计算蛋白浓度。 显示紫外吸收光谱,检测280nm处的吸光度后计算浓度(mg/ml)。和核酸检测一样,记录显示的是10mm光程下的数据。 在基座模式下可以*多检测90mg/ml的BSA而不用稀释。 当检测样品的吸光后的光强小于200时(10mm光程下),软件会提示用户选择更小的测量光程,以保证测试的准确性。荧幕如下图显示。 决定液体表面张力的主要因素是溶液中水分子之间的氢键微量分光光度计,通常情况下,水中的物质,如蛋白、盐离子、去污剂等都会通过破坏水分子之间的氢键来减小表面张力。虽然对于大部分样品来说,1ul的量就足够用于检测了,但由于表面张力下降,我们建议使用2ul的量以保证形成液柱。 可选择或取消基线校准。蛋白检测默认的基线校准波长为340nm,用户可根据试验需要输入不同的校准波长。在任何情况下,基线都自动设定为选择波长下的吸光度,所有波长的吸光度读数都是减去这个值的结果。    注意:基线校准必须在进行样品检测之前设定,样品检测之后设定无效。不选择基线校准,光谱值将会产生偏移,计算的浓度也会改变。 ⑵操作步骤: ①设定项目名称和样品编号与蛋白类型; ②使用缓冲液建立空白对照:取2ul空白溶液加到下基座上,放下上基座并点击“空白”; ③使用干净无尘布把基座上的空白溶液擦干净;    ④取2ul样品滴加到下基座上,放下上基座,点击“样品”进行检测,检测完成后界面如图4.10;    注意:每次检测的样品都必须是刚加入的。 ⑤检测完成后,必须用干净的无尘布擦掉上下基座上的样品,才可以检测下一个样品。